GENERALIDADES
El diagnóstico de las enfermedades infecciosas se basa en el estudio de los síntomas y signos clínicos, así como en la demostración de la presencia del agente, de productos o de la huella que éste ha dejado en su contacto con el sistema inmune del individuo.
Toda la información diagnóstica que el laboratorio de microbiología puede proporcionar, depende de la calidad de la muestra recibida. Por ello, una toma mal realizada, pobremente recogida o mal transportada determinará un posible fallo en la recuperación de los agentes patógenos, que puede inducir a errores diagnósticos, e incluso a un tratamiento inadecuado del enfermo.
Normas básicas generales
1. Solicitud de análisis
Las muestras deben venir acompañadas de su respectiva hoja de pedido donde debe especificar con claridad los datos del paciente y la muestra:
1) Nombre completo
2) Edad
3) Sexo
4) Tipo de muestra: urocultivo, líquido cefalorraquídeo, exudado de herida, secreciones purulentas, etc.
5) Consignar si el paciente recibió antibióticos (ATB) en los últimos 7 días, si es así anotar nombre del ATB, dosis y vías de administración.
2. Consideraciones para la toma de muestra
Los tubos o frascos donde se colocan las muestras deben ser estériles con tapón hermético. Las muestras se deben obtener antes de iniciar el tratamiento antibiótico o antiviral. Cuando esto no es posible, se obtendrán justo antes de la administración de la dosis del antimicrobiano, o tras 48 horas de finalizado el tratamiento.
En todas las localizaciones es necesario que la toma se efectúe en el sitio exacto de la lesión con las máximas condiciones de asepsia.
Todas las situaciones no previstas en este manual deben ser consultadas con los especialistas en Microbiología antes de tomar las muestras.
En caso de no disponer de alguno de los sistemas de transporte recomendados consultar con la Sección de Microbiología
3. Criterios de rechazo de solicitudes y/o muestras
No se indica en la solicitud de examen el tipo de muestra a analizar y/o procedencia anatómica del mismo.
Muestra enviada en frasco no estéril o con conservantes (formol).
Muestra inadecuada para realizar el estudio solicitado.
Muestra en cantidad insuficiente para realizar los exámenes solicitados.
Muestra evidentemente contaminada.
1.- MUESTRAS DEL TRACTO RESPIRATORIO
1. MUESTRAS DEL TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR
a) EXUDADO FARINGEO
En general, con esta muestra se realizan cultivos, para determinar la presencia de gérmenes patógenos (como el estreptococo beta hemolítico).
Material necesario
- Baja lenguas (imprescindible).
- Hisopos estériles de algodón.
- Medio de transporte (Stuart).
- Porta objetos
- Barbijo, guantes para el operador.
- Fuente luminosa.
Técnica
- Primeramente identificar todo el material a utilizar para la toma de muestra.
- Indicar al paciente lavarse la boca con agua tibia para eliminar la flora bucal.
- Colocar al paciente frente a una fuente luminosa o ayudarse con una linterna.
- Pedirle que respire profundamente y que abra la boca y diga ah, ah, ah, ah, para que la úvula no se mueva y no provoque arcadas.
- Bajo visión directa, con la ayuda del baja lengua, se tocará con el hisopo en todas las partes con exudado, membranas o inflamación. Se deben frotar los pilares amigdalinos y la faringe posterior hacia atrás y adelante. En lo posible no tocar la mucosa oral, lengua, úvula ni dientes.
- Colocar la muestra en el medio de transporte (Stuart).
- Con otro hisopo realizar el extendido en el porta objetos ya identificado.
Numero de muestras y/o volumen
Dos veces tomar la muestra (un extendido en un porta objeto y otro en el medio de transporte).
Transporte y conservación de la muestra
Envío inmediato al laboratorio (no superior a 2 horas).
Si no es posible, conservar en heladera a 4ºC hasta 12 horas.
Observaciones
Se investigará rutinariamente la presencia de Streptococcus beta-hemolítico del grupo A (S. pyogenes) y otros grupos beta hemolíticos como C y G.
b) CAVIDAD OROFARINGEA
Esta muestra se emplea habitualmente para el diagnóstico de la llamada "Angina de Vincent". Este tipo de muestra conviene obtenerla en el Laboratorio de Microbiología.
Material necesario
- Hisopos estériles de algodón
- Medio de transporte (Stuart).
- Porta objetos limpios.
- Barbijo, guantes para el operador.
Técnica
- Se pedirá al paciente que se enjuague la boca con agua.
- Frotar o raspar las lesiones con un hisopo y hacer una extensión sobre el porta objetos.
- Con el otro hisopo colocarlo en el medio de transporte (Stuart).
Número de muestras y/o volumen
Dos veces tomar la muestra (un extendido en un porta objeto y otro en el medio de transporte).
Transporte y conservación
Envío inmediato al laboratorio (no superior a 2 horas).
Si no es posible, conservar en heladera a 4ºC hasta 12 horas.
c) EXUDADO NASAL
Esta muestra es útil para buscar portadores de Staphylococcus aureus sobre todo en personal de salud en caso de brote epidémico o en el diagnóstico etiológico de impétigo. No es útil para el diagnóstico etiológico en casos de rinitis, rinosinusitis ni en casos de otitis media ni cuadros respiratorios altos prolongados. Recordamos que alrededor del 30% de la población es portadora de este microorganismo a nivel nasofaríngeo por lo cual su hallazgo no tiene habitualmente significancia clínica salvo en situaciones especiales.
Material necesario
- Hisopos estériles de algodón
- Medio de transporte (Stuart).
- Porta objetos.
Técnica
- El operador debe protegerse con barbijo y guantes.
- Con el pulgar de la mano levantar suavemente la punta de la nariz.
- Tomar muestra profunda de ambas fosas nasales con el mismo hisopo, previamente embebido en suero fisiológico estéril, dar movimientos de rotación presionando sobre el tabique nasal.
- Colocar en medio de transporte y realizar un extendido.
Número de muestras y/o volumen
Dos veces tomar la muestra (un extendido en un porta objeto y otro en el medio de transporte).
Transporte y conservación
Envío inmediato al laboratorio (no superior a 2 horas).
Observación
Se deberá consignar en la solicitud de análisis si hay lesiones o costras a nivel nasal (muy importante).
2.- MUESTRAS DE OÍDO
a) CONDUCTO AUDITIVO EXTERNO
Solo se utiliza para conocer la etiología en caso de otitis externa. Suele tratarse de muestras de mala calidad y en ningún caso resultan representativas de los microorganismos existentes en el oído medio.
Material necesario
- Hisopos estériles de algodón
- Porta objetos
- Suero fisiológico estéril.
- Medio de transporte (Stuart).
Técnica
- Primero limpiar posibles restos de pus o secreciones del conducto auditivo externo con hisopo humedecido en suero fisiológico y descartar.
- Luego tomar muestra del oído indicado o de ambos por separado frotando con nuevo hisopo contra las paredes.
- Colocarlos en el medio de transporte y realizar un extendido.
Número de muestras y/o volumen
Cuatro veces tomar la muestra, dos extendido en un porta objeto (uno para cada oído y dos en el medio de transporte uno para cada oído).En caso de especificar solo un oído serán solo dos muestras.
Transporte y conservación
Envío inmediato al laboratorio (no superior a 2 horas).
MUESTRAS OCULARES
Por vecindad estas muestras se estudian con las del tracto respiratorio superior.
a) EXUDADO CONJUNTIVAL
Este tipo de muestras sirve para el diagnóstico de conjuntivitis de causa bacteriana. Estas son a menudo unilaterales. De todas maneras se solicita que se haga la toma de muestra de ambos sacos conjuntivales por separado, de manera de poder valorar la flora normal. Siempre que sea posible se realizará la toma de muestra en el Laboratorio de Microbiología.
Material necesario
- Hisopos estériles de algodón
- Medio de transporte (Stuart).
- Suero fisiológico estéril.
Técnica
- Debe obtenerse la muestra antes de la instilación de los analgésicos locales, colirios o antibióticos.
- Con un hisopo mojado en suero fisiológico frotar sobre la conjuntiva tarsal inferior y el fórnix de afuera hacia adentro.
- Colocarlo el medio de transporte Stuart y otro hisopo hacer un extendido en el porta objetos
Número de muestras y/o volumen
Deberá utilizarse dos hisopos para cada ojo.
Transporte y conservación
El transporte deberá ser inmediato. Cuando no sea posible, se utilizarán hisopos con medio de transporte tipo Stuart o Amies, que se mantendrán a temperatura ambiente.
Observación
Los cultivos de conjuntiva preoperatorios no son útiles. El número y tipo de microorganismos de la conjuntiva normal varía diariamente, por lo que estas muestras no son válidas, excepto en el caso de signos inflamatorios a nivel ocular.
3.- MUESTRAS DEL TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR
El tracto respiratorio comienza en el pasaje nasal, se extiende a través de la nasofaringe hasta los pulmones.
Diversos mecanismos protegen el tracto respiratorio de las infecciones, como ser: Pelos, mucus, tos, deglución, estornudo, lisozimas que impiden que los microorganismos ingresen a los bronquios y lleguen a los pulmones.
Cuando los microorganismos logran vencer estas barreras se adhieren a la mucosa, la colonizan y ocasionan infecciones respiratorias agudas.
El aparato respiratorio bajo o inferior es normalmente estéril, pero muchos microorganismos por su virulencia hacen que se consideren causantes de infecciones.
a) EXPECTORACIÓN
La toma de muestra de esputo requiere de mucho cuidado, ya que un esputo mal tomado, es decir contaminado con flora de la boca y la garganta puede llevar a errores de diagnóstico. En las condiciones habituales de la clínica diaria, no es una muestra representativa de la situación existente en el tracto respiratorio inferior por su mezcla con secreciones procedentes de todo el árbol traqueo-bronquial y con la flora saprófita de la orofaringe.
Material necesario
- Frasco estéril de boca ancha y hermético.
Técnica: Obtención de la muestra
- Instruir al paciente lavarse la boca haciendo buches con agua hervida y enfriada, si es posible hacer gárgaras con el objeto de eliminar la flora saprófita de la boca (no usar enjuague comercial, por que contiene antisépticos como la clorhexidina).
-Expulsar el esputo en el interior del frasco, teniendo cuidado de no derramar al exterior para no contaminar al personal del laboratorio.
- La muestra debe ser representativa y de calidad.
- El paciente no deberá estar con tratamiento de antibiótico.
- Deberá ser tomada las primeras horas de la mañana.
- Deberá ser producto de una tos profunda (esputo traquiobronquial).
- Si la muestra fuera escasa con los aspirados bronquiales se utiliza una solución salina para fluidificar las secreciones.
- Obtener el esputo tras una expectoración profunda luego de un esfuerzo de tos, preferentemente matinal.
- La saliva no sirve para realizar este estudio.
Número de muestras y/o volumen
De 2 a 10 ml, si es posible.
Transporte y conservación
Envío inmediato al laboratorio (no superior a 2 horas).Tener cuidado que no sea mayor el tiempo, por que algunas bacterias como el neumococo se autolisan.
Observación
- Es preferible realizar la toma antes de instaurar el tratamiento antibiótico.
- No es útil para anaerobios.
- No son inoculables las secreciones de sospechosa procedencia.
- La expectoración debe rechazarse hasta obtener un esputo de calidad suficiente (más de 25 leucocitos polimorfonucleares y menos de 10 células epiteliales por campo 100x).
- Si no se obtiene muestra representativa del tracto respiratorio inferior, es inútil insistir con esta técnica diagnóstica.
- Si el pedido incluye baciloscopía se deben recoger 3 muestras en 3 días sucesivos.
b) ASPIRADO TRAQUEAL O SECRECIONES TRAQUEALES
Esta muestra se utiliza fundamentalmente para valorar la colonización del tracto respiratorio en el paciente ventilado. Tiene valor análogo al esputo por su contaminación con la flora orofaríngea. No obstante un resultado de cultivo semicuantitativo de 3 o 4 cruces (desarrollo en 3 o 4 cuadrantes de la placa de Petri) se correlaciona bien con la etiología de la neumonía en el paciente ventilado.
Esta muestra se obtiene con sonda de aspiración por personal de enfermería debidamente entrenado.
Se enviará al laboratorio en tubo estéril o en tubuladura de suero.
Tiene las mismas consideraciones que la expectoración.
4.- SANGRE
a) HEMOCULTIVOS
Material necesario
- Frascos de hemocultivo proporcionados por el Laboratorio de Microbiología.
- Torniquete
- Jeringas y agujas de punción i/v.
- Torundas de algodón.
- Guantes.
- Alcohol etílico o isopropílico al 70%.
Técnica: Obtención de la muestra
El procedimiento de extracción de sangre para la realización de hemocultivos se debe realizar cumpliendo las máximas precauciones de asepsia.
1. Lavarse las manos.
2. Colocarse los guantes.
3. Colocar ligadura y campo estéril.
4. Palpar la vena a puncionar.
5. Realizar antisepsia con alcohol 70% en una zona de piel de unos 10cm de diámetro alrededor del sitio de punción. Se comenzará por el centro y se irán haciendo círculos concéntricos hacia el exterior.
6. Dejar actuar 1-2 minutos, esto es: hasta que se seque el antiséptico sobre la piel.
7. Mientras actúa el antiséptico, desinfectar el tapón de goma del frasco de hemocultivo con alcohol 70%.
8. Extraer la sangre sin tocar en ningún momento el campo desinfectado. Si fuera necesario palpar nuevamente la vena se realizará nueva antisepsia de piel.
9. Inyectar directamente la sangre en el frasco. No es necesario cambiar de aguja.
10. Mover los frascos para que la sangre y el medio de enriquecimiento se mezclen.
11. Para frascos de sistemas automatizados, retirar las tirillas de las botellas y pegarlas en la hoja de pedido correspondiente al paciente.
Volumen de la muestra
La cantidad de sangre a introducir en cada frasco es de 1-1.5 ml en el caso de pacientes adultos.
En caso de neonatos y niños pequeños en que no se pueden obtener volúmenes grandes de sangre, es suficiente una cantidad 0.5-1ml por frasco. En estos casos se utilizan botellas de hemocultivo pediátrico.
Numero de muestras
De acuerdo a la solicitud del médico tratante. Hemocultivos de una sola muestra será tomada previo al tratamiento antimicrobiano, dos o mas, el intérvalo será especificado por el mismo, el intervalo de tiempo entre las extracciones es suficiente con una hora, pero cuando exista una gran urgencia en iniciar el tratamiento, este intervalo puede acortarse hasta 15 minutos o se pueden extraer dos muestras simultáneas de diferentes sitios de punción. En caso de endocarditis subaguda se recomienda aumentar a tres frascos de hemocultivo repartidos en 24 horas y en caso de que la primera serie sea negativa, obtener tres muestras más al día siguiente. Si el paciente está recibiendo antibióticos puede ser necesario obtener otra serie de hemocultivos al tercer día.
Transporte
Deben enviarse en forma inmediata al laboratorio una vez finalizada la serie. Mientras, mantener a temperatura ambiente. Nunca debe refrigerarse ni congelarse.
Observaciones
- Cuando no haya venas accesibles puede realizarse la extracción de sangre arterial. No son adecuadas las muestras extraídas a través de catéteres.
- En caso de sospecha de determinados microorganismos (Brucella spp, Leptospiras, Micobacterias, Hongos, etc.) ponerse en contacto con el Laboratorio de Microbiología.
- En caso que el paciente esté recibiendo antibióticos realizar la toma previa a la administración de la dosis de antimicrobiano.
- Si se evita conversar durante la toma de la muestra no es necesario colocarse barbijo.
- En sala de inmunodeprimidos sí es aconsejable el uso de gorro y barbijo.
5.- MUESTRAS DEL TRACTO URINARIO
La orina es un excelente medio de cultivo para la proliferación bacteriana, por esta razón , la muestra debe ser procesada dentro de las 2 horas después de haber sido obtenida o debe refrigerarse a 4ºC (máximo 24 horas.) hasta su procesamiento.
Generalmente el desarrollo de dos o más tipos de colonias (en pacientes sin sonda vesical) indica que la muestra se ha contaminado por recolección incorrecta o demora en la siembra.
a) UROCULTIVO Orina obtenida por “Chorro medio”
Material necesario
- Gasas estériles.
- Jabón neutro.
- Recipiente de boca ancha con tapa de rosca hermético y estéril.
Técnica: Obtención de la orina
La muestra idónea es la primera micción de la mañana, ya que permite la multiplicación de bacterias durante la noche.
1. Técnica para las mujeres
- Lavarse las manos cuidadosamente con agua y jabón, enjuagar con agua y secar con una toalla limpia.
- Se separarán los labios mayores y menores, y los mantendrá separados en todo momento hasta que se haya recogido la orina.
- Con una gasa enjabonada se lava bien la vulva pasándola de delante hacia atrás, se repetirá el proceso un total de 4 veces.
- Enjuagar cuidadosamente con agua para eliminar los restos de jabón.
- Se indicará a la paciente desechar el primer chorro tras lo cual y sin interrumpir la micción, se recogerá el resto de la orina en el recipiente, el cual se cerrará inmediatamente y se llevará al laboratorio lo más rápidamente posible.
2.- Técnica para los hombres
- Lavado de las manos con agua y jabón.
- Retraer completamente el prepucio, que se mantendrá así en todo momento, hasta que se haya recogido la orina.
- Limpiar el glande con jabón neutro, eliminar los restos de jabón enjuagándolo con agua.
- Se pedirá al paciente desechar el primer chorro y sin interrumpir la micción, recoger el resto de la orina en el recipiente estéril.
b) OBTENCIÓN DE ORINA PARA UROCULTIVO EN EL PACIENTE CON SONDA VESICAL
Material necesario
- Torundas de algodón.
- Alcohol 70º o Yodo povidona 10%.
- Jeringa o aguja estéril.
- Recipiente estéril.
Obtención de la muestra
1. Si es posible realizar la toma inmediatamente luego del recambio de la sonda.
2. Pinzar la sonda a 10 cm del meato durante 1 a 2 dos horas como máximo.
3. Sin despinzar, desinfectar la sonda con alcohol al 70%, de 3-4 cm por encima de la pinza.
4. Extraer orina puncionando la sonda con jeringa y aguja.
5. Colocar la orina en frasco estéril.
c) PUNCIÓN SUPRAPÚBICA
Es un procedimiento médico.
Indicaciones. Evidencia clínica de infección urinaria con recuentos bajos o nulos, neonatos y lactantes y urocultivos repetidos con dos o más bacterias.
Se debe indicar en la orden médica la técnica empleada para su extracción (dato importante a la hora de valorar el recuento de colonias).
Volumen mínimo de la muestra
Es suficiente un volumen de orina mínimo de 5-10 ml.
Transporte
La orina debe llegar al laboratorio en el plazo de una hora. Cuando esto no sea posible debe refrigerarse a 4ºC durante un tiempo máximo de 12 horas.
Observaciones
En caso de que no indique en la orden la técnica empleada de obtención de la muestra, el personal que tomó la muestra debe especificar la técnica en el recipiente donde ha obtenido la muestra.
5.- LÍQUIDOS BIOLÓGICOS
a) LIQUIDO CEFALORRAQUÍDEO (punción lumbar)
Es un procedimiento médico.
Material necesario
Envase totalmente estéril, es necesario que estén totalmente limpios, no alcanza con que estén sólo estériles pues la presencia de bacterias muertas por la esterilización puede inducir a errores por tinciones falsamente positivas.
- No se deben usar tampoco frascos que hayan contenido medicamentos como por ejemplo antibióticos aunque estén estériles, porque restos de medicación pueden tener efecto antimicrobiano y negativizar los cultivos.
Obtención de la muestra
- Se obtendrá antes de instaurar cualquier terapéutica antibiótica.
- Quien realice la toma de la muestra deberá lavarse las manos previo al procedimiento, colocarse sobretúnica y guantes estériles.
- El líquido cefalorraquídeo se recogerá en tres tubos, sin conservantes, con tapón de rosca.
- El primer tubo es el que debe enviarse para el estudio bioquímico, el segundo para el estudio microbiológico y el tercero para investigación de células (este suele ser el más transparente aunque la punción haya sido traumática). No obstante, el tubo más turbio se enviará a Microbiología.
Volumen mínimo
- Para el estudio bacteriológico rutinario es suficiente 1ml, aunque es preferible disponer de volúmenes superiores.
- Para hongos o micobacterias se necesitan al menos 2ml adicionales más por cada uno de los estudios, siendo deseable llegar a los 10ml.
- Para estudio de virus se necesita por lo menos 1ml más.
Transporte
- El producto debe enviarse inmediatamente al laboratorio, pues algunos de los agentes etiológicos como Streptococcus pneumoniae, pueden lisarse rápidamente a partir de una hora tras su recogida. Si no es posible se mantendrá en estufa a 35-37ºC y una parte se incubará en un frasco de hemocultivo que se mantendrá en idénticas condiciones hasta su procesamiento en el laboratorio. Si no se dispone de estufas se mantendrá a temperatura ambiente. Nunca deberá refrigerarse pues se puede afectar la viabilidad de Neisseria meningitidis y Haemuphylus influenzae.
- En el LCR no se estudian rutinariamente anaerobios. En caso de solicitar esta investigación se enviará en un medio de transporte de líquidos para estudio de anaerobios o en frasco de hemocultivo anaerobios.
- Las muestras para el estudio de virus se enviarán en hielo, si el envío se retrasa más de 24 horas, se deberá de conservar a -70ºC.
Observaciones
- Como la meningitis suele surgir por un proceso bacteriémico se solicitarán simultáneamente hemocultivos, pudiendo ser así mismo estudiadas las posibles lesiones metastásicas cutáneas.
- Es necesario que el médico señale claramente las investigaciones solicitadas (bacterias habituales, micobacterias, anaerobios, hongos o virus).
6.- OTROS LÍQUIDOS BIOLÓGICOS
a) PERITONEAL (ASCITIS), PERICÁRDICO, PLEURAL, ARTICULAR O SINOVIAL
La toma de muestra, para la obtención de estos líquidos, es un procedimiento médico que requiere de ciertos cuidados para obtener una muestra adecuada para el examen microbiológico.
Material necesario para su transporte
- Recipientes estériles de boca ancha (ejemplo: frasco de urocultivo).
- Sistemas de transporte de líquidos para estudio de anaerobios.
- Frascos de hemocultivos.
Obtención de la muestra
Varía dependiendo del líquido corporal que se trate, pero siempre deberá seguirse una técnica rigurosamente aséptica. La muestra se obtiene por punción y se coloca en recipientes adecuados para su envío al laboratorio. Siempre que sea posible evitar el uso de hisopos.
Volumen mínimo
Para el estudio bacteriano rutinario es suficiente de 1 a 10 ml. Cuando se requiera la investigación de Mycobacterium spp. u hongos se enviará un volumen superior a 10 ml.
Transporte
- Los recipientes idóneos son tubos estériles de tapón de rosca o de presión negativa sin conservantes.
- Se llenarán hasta cerca del tapón, de esta forma pueden ser útiles para el estudio de anaerobios, especialmente si la muestra es purulenta.
- Los viales o tubos prerreducidos para el transporte de muestras para el estudio de anaerobios se emplearán en aquellos casos en que se sospeche este tipo de microorganismos.
- Frascos de Hemocultivos: Este es un sistema adicional a los anteriores. Está particularmente indicado cuando el envío se puede retrasar o en los líquidos que pueden coagularse. Si se sospecha anaerobios emplear uno adecuado para estas bacterias. Con su uso se ha incrementado el aislamiento bacteriano en peritonitis espontáneas o en las asociadas a diálisis peritoneal ambulatoria crónica. También se recomienda como transporte de líquidos articulares.
- En ningún caso se aceptarán hisopos embebidos en el líquido.
- Las muestras deben ser enviadas inmediatamente al laboratorio.
Observaciones
Cuando se utilice una anestesia local, hay que cambiar de jeringa y aguja para hacer la extracción de la muestra, ya que los anestésicos pueden inhibir el crecimiento bacteriano.
7.- LÍQUIDO DE DIALISIS PERITONEAL CRÓNICA AMBULATORIA
- La muestra del líquido de diálisis peritoneal crónica ambulatoria debe ser la propia bolsa que lo contiene.
- La bolsa se enviara de inmediato al laboratorio para su procesamiento o se conservará en la heladera hasta 12 horas.
8.- PIEL Y TEJIDOS BLANDOS
- El espécimen de elección en el caso de infecciones de piel y partes blandas depende del carácter de la lesión y no de los microorganismos que se sospechen.
- Para las lesiones abiertas, se debe remover la flora y detritus superficial antes de recolectar la muestra de los márgenes de avance de la lesión.
- En caso de lesiones secas o costrosas los cultivos no están recomendados salvo que presenten exudado.
- En el caso de abscesos cerrados la recolección se realizará con aguja y jeringa de la pared del mismo, previa antisepsia de piel.
- En el caso de abscesos abiertos se debe descontaminar primero como en el caso de heridas abiertas.
- Las quemaduras se cultivan luego de una extensa limpieza y debridamiento. Se recomiendan cultivos de biopsia ya que los cultivos superficiales pueden ser poco representativos de lo que sucede en la profundidad del tejido.
El diagnóstico de las enfermedades infecciosas se basa en el estudio de los síntomas y signos clínicos, así como en la demostración de la presencia del agente, de productos o de la huella que éste ha dejado en su contacto con el sistema inmune del individuo.
Toda la información diagnóstica que el laboratorio de microbiología puede proporcionar, depende de la calidad de la muestra recibida. Por ello, una toma mal realizada, pobremente recogida o mal transportada determinará un posible fallo en la recuperación de los agentes patógenos, que puede inducir a errores diagnósticos, e incluso a un tratamiento inadecuado del enfermo.
Normas básicas generales
1. Solicitud de análisis
Las muestras deben venir acompañadas de su respectiva hoja de pedido donde debe especificar con claridad los datos del paciente y la muestra:
1) Nombre completo
2) Edad
3) Sexo
4) Tipo de muestra: urocultivo, líquido cefalorraquídeo, exudado de herida, secreciones purulentas, etc.
5) Consignar si el paciente recibió antibióticos (ATB) en los últimos 7 días, si es así anotar nombre del ATB, dosis y vías de administración.
2. Consideraciones para la toma de muestra
Los tubos o frascos donde se colocan las muestras deben ser estériles con tapón hermético. Las muestras se deben obtener antes de iniciar el tratamiento antibiótico o antiviral. Cuando esto no es posible, se obtendrán justo antes de la administración de la dosis del antimicrobiano, o tras 48 horas de finalizado el tratamiento.
En todas las localizaciones es necesario que la toma se efectúe en el sitio exacto de la lesión con las máximas condiciones de asepsia.
Todas las situaciones no previstas en este manual deben ser consultadas con los especialistas en Microbiología antes de tomar las muestras.
En caso de no disponer de alguno de los sistemas de transporte recomendados consultar con la Sección de Microbiología
3. Criterios de rechazo de solicitudes y/o muestras
No se indica en la solicitud de examen el tipo de muestra a analizar y/o procedencia anatómica del mismo.
Muestra enviada en frasco no estéril o con conservantes (formol).
Muestra inadecuada para realizar el estudio solicitado.
Muestra en cantidad insuficiente para realizar los exámenes solicitados.
Muestra evidentemente contaminada.
1.- MUESTRAS DEL TRACTO RESPIRATORIO
1. MUESTRAS DEL TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR
a) EXUDADO FARINGEO
En general, con esta muestra se realizan cultivos, para determinar la presencia de gérmenes patógenos (como el estreptococo beta hemolítico).
Material necesario
- Baja lenguas (imprescindible).
- Hisopos estériles de algodón.
- Medio de transporte (Stuart).
- Porta objetos
- Barbijo, guantes para el operador.
- Fuente luminosa.
Técnica
- Primeramente identificar todo el material a utilizar para la toma de muestra.
- Indicar al paciente lavarse la boca con agua tibia para eliminar la flora bucal.
- Colocar al paciente frente a una fuente luminosa o ayudarse con una linterna.
- Pedirle que respire profundamente y que abra la boca y diga ah, ah, ah, ah, para que la úvula no se mueva y no provoque arcadas.
- Bajo visión directa, con la ayuda del baja lengua, se tocará con el hisopo en todas las partes con exudado, membranas o inflamación. Se deben frotar los pilares amigdalinos y la faringe posterior hacia atrás y adelante. En lo posible no tocar la mucosa oral, lengua, úvula ni dientes.
- Colocar la muestra en el medio de transporte (Stuart).
- Con otro hisopo realizar el extendido en el porta objetos ya identificado.
Numero de muestras y/o volumen
Dos veces tomar la muestra (un extendido en un porta objeto y otro en el medio de transporte).
Transporte y conservación de la muestra
Envío inmediato al laboratorio (no superior a 2 horas).
Si no es posible, conservar en heladera a 4ºC hasta 12 horas.
Observaciones
Se investigará rutinariamente la presencia de Streptococcus beta-hemolítico del grupo A (S. pyogenes) y otros grupos beta hemolíticos como C y G.
b) CAVIDAD OROFARINGEA
Esta muestra se emplea habitualmente para el diagnóstico de la llamada "Angina de Vincent". Este tipo de muestra conviene obtenerla en el Laboratorio de Microbiología.
Material necesario
- Hisopos estériles de algodón
- Medio de transporte (Stuart).
- Porta objetos limpios.
- Barbijo, guantes para el operador.
Técnica
- Se pedirá al paciente que se enjuague la boca con agua.
- Frotar o raspar las lesiones con un hisopo y hacer una extensión sobre el porta objetos.
- Con el otro hisopo colocarlo en el medio de transporte (Stuart).
Número de muestras y/o volumen
Dos veces tomar la muestra (un extendido en un porta objeto y otro en el medio de transporte).
Transporte y conservación
Envío inmediato al laboratorio (no superior a 2 horas).
Si no es posible, conservar en heladera a 4ºC hasta 12 horas.
c) EXUDADO NASAL
Esta muestra es útil para buscar portadores de Staphylococcus aureus sobre todo en personal de salud en caso de brote epidémico o en el diagnóstico etiológico de impétigo. No es útil para el diagnóstico etiológico en casos de rinitis, rinosinusitis ni en casos de otitis media ni cuadros respiratorios altos prolongados. Recordamos que alrededor del 30% de la población es portadora de este microorganismo a nivel nasofaríngeo por lo cual su hallazgo no tiene habitualmente significancia clínica salvo en situaciones especiales.
Material necesario
- Hisopos estériles de algodón
- Medio de transporte (Stuart).
- Porta objetos.
Técnica
- El operador debe protegerse con barbijo y guantes.
- Con el pulgar de la mano levantar suavemente la punta de la nariz.
- Tomar muestra profunda de ambas fosas nasales con el mismo hisopo, previamente embebido en suero fisiológico estéril, dar movimientos de rotación presionando sobre el tabique nasal.
- Colocar en medio de transporte y realizar un extendido.
Número de muestras y/o volumen
Dos veces tomar la muestra (un extendido en un porta objeto y otro en el medio de transporte).
Transporte y conservación
Envío inmediato al laboratorio (no superior a 2 horas).
Observación
Se deberá consignar en la solicitud de análisis si hay lesiones o costras a nivel nasal (muy importante).
2.- MUESTRAS DE OÍDO
a) CONDUCTO AUDITIVO EXTERNO
Solo se utiliza para conocer la etiología en caso de otitis externa. Suele tratarse de muestras de mala calidad y en ningún caso resultan representativas de los microorganismos existentes en el oído medio.
Material necesario
- Hisopos estériles de algodón
- Porta objetos
- Suero fisiológico estéril.
- Medio de transporte (Stuart).
Técnica
- Primero limpiar posibles restos de pus o secreciones del conducto auditivo externo con hisopo humedecido en suero fisiológico y descartar.
- Luego tomar muestra del oído indicado o de ambos por separado frotando con nuevo hisopo contra las paredes.
- Colocarlos en el medio de transporte y realizar un extendido.
Número de muestras y/o volumen
Cuatro veces tomar la muestra, dos extendido en un porta objeto (uno para cada oído y dos en el medio de transporte uno para cada oído).En caso de especificar solo un oído serán solo dos muestras.
Transporte y conservación
Envío inmediato al laboratorio (no superior a 2 horas).
MUESTRAS OCULARES
Por vecindad estas muestras se estudian con las del tracto respiratorio superior.
a) EXUDADO CONJUNTIVAL
Este tipo de muestras sirve para el diagnóstico de conjuntivitis de causa bacteriana. Estas son a menudo unilaterales. De todas maneras se solicita que se haga la toma de muestra de ambos sacos conjuntivales por separado, de manera de poder valorar la flora normal. Siempre que sea posible se realizará la toma de muestra en el Laboratorio de Microbiología.
Material necesario
- Hisopos estériles de algodón
- Medio de transporte (Stuart).
- Suero fisiológico estéril.
Técnica
- Debe obtenerse la muestra antes de la instilación de los analgésicos locales, colirios o antibióticos.
- Con un hisopo mojado en suero fisiológico frotar sobre la conjuntiva tarsal inferior y el fórnix de afuera hacia adentro.
- Colocarlo el medio de transporte Stuart y otro hisopo hacer un extendido en el porta objetos
Número de muestras y/o volumen
Deberá utilizarse dos hisopos para cada ojo.
Transporte y conservación
El transporte deberá ser inmediato. Cuando no sea posible, se utilizarán hisopos con medio de transporte tipo Stuart o Amies, que se mantendrán a temperatura ambiente.
Observación
Los cultivos de conjuntiva preoperatorios no son útiles. El número y tipo de microorganismos de la conjuntiva normal varía diariamente, por lo que estas muestras no son válidas, excepto en el caso de signos inflamatorios a nivel ocular.
3.- MUESTRAS DEL TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR
El tracto respiratorio comienza en el pasaje nasal, se extiende a través de la nasofaringe hasta los pulmones.
Diversos mecanismos protegen el tracto respiratorio de las infecciones, como ser: Pelos, mucus, tos, deglución, estornudo, lisozimas que impiden que los microorganismos ingresen a los bronquios y lleguen a los pulmones.
Cuando los microorganismos logran vencer estas barreras se adhieren a la mucosa, la colonizan y ocasionan infecciones respiratorias agudas.
El aparato respiratorio bajo o inferior es normalmente estéril, pero muchos microorganismos por su virulencia hacen que se consideren causantes de infecciones.
a) EXPECTORACIÓN
La toma de muestra de esputo requiere de mucho cuidado, ya que un esputo mal tomado, es decir contaminado con flora de la boca y la garganta puede llevar a errores de diagnóstico. En las condiciones habituales de la clínica diaria, no es una muestra representativa de la situación existente en el tracto respiratorio inferior por su mezcla con secreciones procedentes de todo el árbol traqueo-bronquial y con la flora saprófita de la orofaringe.
Material necesario
- Frasco estéril de boca ancha y hermético.
Técnica: Obtención de la muestra
- Instruir al paciente lavarse la boca haciendo buches con agua hervida y enfriada, si es posible hacer gárgaras con el objeto de eliminar la flora saprófita de la boca (no usar enjuague comercial, por que contiene antisépticos como la clorhexidina).
-Expulsar el esputo en el interior del frasco, teniendo cuidado de no derramar al exterior para no contaminar al personal del laboratorio.
- La muestra debe ser representativa y de calidad.
- El paciente no deberá estar con tratamiento de antibiótico.
- Deberá ser tomada las primeras horas de la mañana.
- Deberá ser producto de una tos profunda (esputo traquiobronquial).
- Si la muestra fuera escasa con los aspirados bronquiales se utiliza una solución salina para fluidificar las secreciones.
- Obtener el esputo tras una expectoración profunda luego de un esfuerzo de tos, preferentemente matinal.
- La saliva no sirve para realizar este estudio.
Número de muestras y/o volumen
De 2 a 10 ml, si es posible.
Transporte y conservación
Envío inmediato al laboratorio (no superior a 2 horas).Tener cuidado que no sea mayor el tiempo, por que algunas bacterias como el neumococo se autolisan.
Observación
- Es preferible realizar la toma antes de instaurar el tratamiento antibiótico.
- No es útil para anaerobios.
- No son inoculables las secreciones de sospechosa procedencia.
- La expectoración debe rechazarse hasta obtener un esputo de calidad suficiente (más de 25 leucocitos polimorfonucleares y menos de 10 células epiteliales por campo 100x).
- Si no se obtiene muestra representativa del tracto respiratorio inferior, es inútil insistir con esta técnica diagnóstica.
- Si el pedido incluye baciloscopía se deben recoger 3 muestras en 3 días sucesivos.
b) ASPIRADO TRAQUEAL O SECRECIONES TRAQUEALES
Esta muestra se utiliza fundamentalmente para valorar la colonización del tracto respiratorio en el paciente ventilado. Tiene valor análogo al esputo por su contaminación con la flora orofaríngea. No obstante un resultado de cultivo semicuantitativo de 3 o 4 cruces (desarrollo en 3 o 4 cuadrantes de la placa de Petri) se correlaciona bien con la etiología de la neumonía en el paciente ventilado.
Esta muestra se obtiene con sonda de aspiración por personal de enfermería debidamente entrenado.
Se enviará al laboratorio en tubo estéril o en tubuladura de suero.
Tiene las mismas consideraciones que la expectoración.
4.- SANGRE
a) HEMOCULTIVOS
Material necesario
- Frascos de hemocultivo proporcionados por el Laboratorio de Microbiología.
- Torniquete
- Jeringas y agujas de punción i/v.
- Torundas de algodón.
- Guantes.
- Alcohol etílico o isopropílico al 70%.
Técnica: Obtención de la muestra
El procedimiento de extracción de sangre para la realización de hemocultivos se debe realizar cumpliendo las máximas precauciones de asepsia.
1. Lavarse las manos.
2. Colocarse los guantes.
3. Colocar ligadura y campo estéril.
4. Palpar la vena a puncionar.
5. Realizar antisepsia con alcohol 70% en una zona de piel de unos 10cm de diámetro alrededor del sitio de punción. Se comenzará por el centro y se irán haciendo círculos concéntricos hacia el exterior.
6. Dejar actuar 1-2 minutos, esto es: hasta que se seque el antiséptico sobre la piel.
7. Mientras actúa el antiséptico, desinfectar el tapón de goma del frasco de hemocultivo con alcohol 70%.
8. Extraer la sangre sin tocar en ningún momento el campo desinfectado. Si fuera necesario palpar nuevamente la vena se realizará nueva antisepsia de piel.
9. Inyectar directamente la sangre en el frasco. No es necesario cambiar de aguja.
10. Mover los frascos para que la sangre y el medio de enriquecimiento se mezclen.
11. Para frascos de sistemas automatizados, retirar las tirillas de las botellas y pegarlas en la hoja de pedido correspondiente al paciente.
Volumen de la muestra
La cantidad de sangre a introducir en cada frasco es de 1-1.5 ml en el caso de pacientes adultos.
En caso de neonatos y niños pequeños en que no se pueden obtener volúmenes grandes de sangre, es suficiente una cantidad 0.5-1ml por frasco. En estos casos se utilizan botellas de hemocultivo pediátrico.
Numero de muestras
De acuerdo a la solicitud del médico tratante. Hemocultivos de una sola muestra será tomada previo al tratamiento antimicrobiano, dos o mas, el intérvalo será especificado por el mismo, el intervalo de tiempo entre las extracciones es suficiente con una hora, pero cuando exista una gran urgencia en iniciar el tratamiento, este intervalo puede acortarse hasta 15 minutos o se pueden extraer dos muestras simultáneas de diferentes sitios de punción. En caso de endocarditis subaguda se recomienda aumentar a tres frascos de hemocultivo repartidos en 24 horas y en caso de que la primera serie sea negativa, obtener tres muestras más al día siguiente. Si el paciente está recibiendo antibióticos puede ser necesario obtener otra serie de hemocultivos al tercer día.
Transporte
Deben enviarse en forma inmediata al laboratorio una vez finalizada la serie. Mientras, mantener a temperatura ambiente. Nunca debe refrigerarse ni congelarse.
Observaciones
- Cuando no haya venas accesibles puede realizarse la extracción de sangre arterial. No son adecuadas las muestras extraídas a través de catéteres.
- En caso de sospecha de determinados microorganismos (Brucella spp, Leptospiras, Micobacterias, Hongos, etc.) ponerse en contacto con el Laboratorio de Microbiología.
- En caso que el paciente esté recibiendo antibióticos realizar la toma previa a la administración de la dosis de antimicrobiano.
- Si se evita conversar durante la toma de la muestra no es necesario colocarse barbijo.
- En sala de inmunodeprimidos sí es aconsejable el uso de gorro y barbijo.
5.- MUESTRAS DEL TRACTO URINARIO
La orina es un excelente medio de cultivo para la proliferación bacteriana, por esta razón , la muestra debe ser procesada dentro de las 2 horas después de haber sido obtenida o debe refrigerarse a 4ºC (máximo 24 horas.) hasta su procesamiento.
Generalmente el desarrollo de dos o más tipos de colonias (en pacientes sin sonda vesical) indica que la muestra se ha contaminado por recolección incorrecta o demora en la siembra.
a) UROCULTIVO Orina obtenida por “Chorro medio”
Material necesario
- Gasas estériles.
- Jabón neutro.
- Recipiente de boca ancha con tapa de rosca hermético y estéril.
Técnica: Obtención de la orina
La muestra idónea es la primera micción de la mañana, ya que permite la multiplicación de bacterias durante la noche.
1. Técnica para las mujeres
- Lavarse las manos cuidadosamente con agua y jabón, enjuagar con agua y secar con una toalla limpia.
- Se separarán los labios mayores y menores, y los mantendrá separados en todo momento hasta que se haya recogido la orina.
- Con una gasa enjabonada se lava bien la vulva pasándola de delante hacia atrás, se repetirá el proceso un total de 4 veces.
- Enjuagar cuidadosamente con agua para eliminar los restos de jabón.
- Se indicará a la paciente desechar el primer chorro tras lo cual y sin interrumpir la micción, se recogerá el resto de la orina en el recipiente, el cual se cerrará inmediatamente y se llevará al laboratorio lo más rápidamente posible.
2.- Técnica para los hombres
- Lavado de las manos con agua y jabón.
- Retraer completamente el prepucio, que se mantendrá así en todo momento, hasta que se haya recogido la orina.
- Limpiar el glande con jabón neutro, eliminar los restos de jabón enjuagándolo con agua.
- Se pedirá al paciente desechar el primer chorro y sin interrumpir la micción, recoger el resto de la orina en el recipiente estéril.
b) OBTENCIÓN DE ORINA PARA UROCULTIVO EN EL PACIENTE CON SONDA VESICAL
Material necesario
- Torundas de algodón.
- Alcohol 70º o Yodo povidona 10%.
- Jeringa o aguja estéril.
- Recipiente estéril.
Obtención de la muestra
1. Si es posible realizar la toma inmediatamente luego del recambio de la sonda.
2. Pinzar la sonda a 10 cm del meato durante 1 a 2 dos horas como máximo.
3. Sin despinzar, desinfectar la sonda con alcohol al 70%, de 3-4 cm por encima de la pinza.
4. Extraer orina puncionando la sonda con jeringa y aguja.
5. Colocar la orina en frasco estéril.
c) PUNCIÓN SUPRAPÚBICA
Es un procedimiento médico.
Indicaciones. Evidencia clínica de infección urinaria con recuentos bajos o nulos, neonatos y lactantes y urocultivos repetidos con dos o más bacterias.
Se debe indicar en la orden médica la técnica empleada para su extracción (dato importante a la hora de valorar el recuento de colonias).
Volumen mínimo de la muestra
Es suficiente un volumen de orina mínimo de 5-10 ml.
Transporte
La orina debe llegar al laboratorio en el plazo de una hora. Cuando esto no sea posible debe refrigerarse a 4ºC durante un tiempo máximo de 12 horas.
Observaciones
En caso de que no indique en la orden la técnica empleada de obtención de la muestra, el personal que tomó la muestra debe especificar la técnica en el recipiente donde ha obtenido la muestra.
5.- LÍQUIDOS BIOLÓGICOS
a) LIQUIDO CEFALORRAQUÍDEO (punción lumbar)
Es un procedimiento médico.
Material necesario
Envase totalmente estéril, es necesario que estén totalmente limpios, no alcanza con que estén sólo estériles pues la presencia de bacterias muertas por la esterilización puede inducir a errores por tinciones falsamente positivas.
- No se deben usar tampoco frascos que hayan contenido medicamentos como por ejemplo antibióticos aunque estén estériles, porque restos de medicación pueden tener efecto antimicrobiano y negativizar los cultivos.
Obtención de la muestra
- Se obtendrá antes de instaurar cualquier terapéutica antibiótica.
- Quien realice la toma de la muestra deberá lavarse las manos previo al procedimiento, colocarse sobretúnica y guantes estériles.
- El líquido cefalorraquídeo se recogerá en tres tubos, sin conservantes, con tapón de rosca.
- El primer tubo es el que debe enviarse para el estudio bioquímico, el segundo para el estudio microbiológico y el tercero para investigación de células (este suele ser el más transparente aunque la punción haya sido traumática). No obstante, el tubo más turbio se enviará a Microbiología.
Volumen mínimo
- Para el estudio bacteriológico rutinario es suficiente 1ml, aunque es preferible disponer de volúmenes superiores.
- Para hongos o micobacterias se necesitan al menos 2ml adicionales más por cada uno de los estudios, siendo deseable llegar a los 10ml.
- Para estudio de virus se necesita por lo menos 1ml más.
Transporte
- El producto debe enviarse inmediatamente al laboratorio, pues algunos de los agentes etiológicos como Streptococcus pneumoniae, pueden lisarse rápidamente a partir de una hora tras su recogida. Si no es posible se mantendrá en estufa a 35-37ºC y una parte se incubará en un frasco de hemocultivo que se mantendrá en idénticas condiciones hasta su procesamiento en el laboratorio. Si no se dispone de estufas se mantendrá a temperatura ambiente. Nunca deberá refrigerarse pues se puede afectar la viabilidad de Neisseria meningitidis y Haemuphylus influenzae.
- En el LCR no se estudian rutinariamente anaerobios. En caso de solicitar esta investigación se enviará en un medio de transporte de líquidos para estudio de anaerobios o en frasco de hemocultivo anaerobios.
- Las muestras para el estudio de virus se enviarán en hielo, si el envío se retrasa más de 24 horas, se deberá de conservar a -70ºC.
Observaciones
- Como la meningitis suele surgir por un proceso bacteriémico se solicitarán simultáneamente hemocultivos, pudiendo ser así mismo estudiadas las posibles lesiones metastásicas cutáneas.
- Es necesario que el médico señale claramente las investigaciones solicitadas (bacterias habituales, micobacterias, anaerobios, hongos o virus).
6.- OTROS LÍQUIDOS BIOLÓGICOS
a) PERITONEAL (ASCITIS), PERICÁRDICO, PLEURAL, ARTICULAR O SINOVIAL
La toma de muestra, para la obtención de estos líquidos, es un procedimiento médico que requiere de ciertos cuidados para obtener una muestra adecuada para el examen microbiológico.
Material necesario para su transporte
- Recipientes estériles de boca ancha (ejemplo: frasco de urocultivo).
- Sistemas de transporte de líquidos para estudio de anaerobios.
- Frascos de hemocultivos.
Obtención de la muestra
Varía dependiendo del líquido corporal que se trate, pero siempre deberá seguirse una técnica rigurosamente aséptica. La muestra se obtiene por punción y se coloca en recipientes adecuados para su envío al laboratorio. Siempre que sea posible evitar el uso de hisopos.
Volumen mínimo
Para el estudio bacteriano rutinario es suficiente de 1 a 10 ml. Cuando se requiera la investigación de Mycobacterium spp. u hongos se enviará un volumen superior a 10 ml.
Transporte
- Los recipientes idóneos son tubos estériles de tapón de rosca o de presión negativa sin conservantes.
- Se llenarán hasta cerca del tapón, de esta forma pueden ser útiles para el estudio de anaerobios, especialmente si la muestra es purulenta.
- Los viales o tubos prerreducidos para el transporte de muestras para el estudio de anaerobios se emplearán en aquellos casos en que se sospeche este tipo de microorganismos.
- Frascos de Hemocultivos: Este es un sistema adicional a los anteriores. Está particularmente indicado cuando el envío se puede retrasar o en los líquidos que pueden coagularse. Si se sospecha anaerobios emplear uno adecuado para estas bacterias. Con su uso se ha incrementado el aislamiento bacteriano en peritonitis espontáneas o en las asociadas a diálisis peritoneal ambulatoria crónica. También se recomienda como transporte de líquidos articulares.
- En ningún caso se aceptarán hisopos embebidos en el líquido.
- Las muestras deben ser enviadas inmediatamente al laboratorio.
Observaciones
Cuando se utilice una anestesia local, hay que cambiar de jeringa y aguja para hacer la extracción de la muestra, ya que los anestésicos pueden inhibir el crecimiento bacteriano.
7.- LÍQUIDO DE DIALISIS PERITONEAL CRÓNICA AMBULATORIA
- La muestra del líquido de diálisis peritoneal crónica ambulatoria debe ser la propia bolsa que lo contiene.
- La bolsa se enviara de inmediato al laboratorio para su procesamiento o se conservará en la heladera hasta 12 horas.
8.- PIEL Y TEJIDOS BLANDOS
- El espécimen de elección en el caso de infecciones de piel y partes blandas depende del carácter de la lesión y no de los microorganismos que se sospechen.
- Para las lesiones abiertas, se debe remover la flora y detritus superficial antes de recolectar la muestra de los márgenes de avance de la lesión.
- En caso de lesiones secas o costrosas los cultivos no están recomendados salvo que presenten exudado.
- En el caso de abscesos cerrados la recolección se realizará con aguja y jeringa de la pared del mismo, previa antisepsia de piel.
- En el caso de abscesos abiertos se debe descontaminar primero como en el caso de heridas abiertas.
- Las quemaduras se cultivan luego de una extensa limpieza y debridamiento. Se recomiendan cultivos de biopsia ya que los cultivos superficiales pueden ser poco representativos de lo que sucede en la profundidad del tejido.
a) HERIDAS SUPERFICIALES Y ABSCESOS ABIERTOS
Material necesario
- Suero fisiológico.
- Jeringa y aguja estériles.
- Recipientes estériles con tapa de rosca.
- Hisopos estériles de algodón
- Medio de transporte Stuart.
Técnica
- Lavar con suero fisiológico estéril cuidadosamente la superficie de la herida para retirar la flora colonizante.
- Recoger el pus mediante jeringa y aguja, aspirando preferentemente de zonas profundas.
- Cuando la muestra sea insuficiente, instilar suero o solución de Ringer lactato y aspirarlo nuevamente en la jeringa.
- Cuando los procedimientos anteriores no sean factibles podrá efectuarse un frotis de los bordes de la herida con un hisopo y con un segundo hisopo se colocara en el medio de transporte.
Número de muestras y/o volumen
Para muestras líquidas se intentará obtener 1-10 ml. En el resto de las ocasiones se enviará la máxima cantidad posible haciendo un extendido en el porta objetos y colocando en medio de transporte.
Transporte y conservación
- El envío al laboratorio debe ser inmediato. Se utilizará para el envío tubos estériles con tapa rosca.
- La jeringa de la extracción será evacuada en el recipiente en que se hará el envío. La práctica de colocar un tapón de goma en la aguja (usando la jeringa como recipiente de transporte) debe desecharse por el riesgo para el personal de sufrir un pinchazo con una aguja contaminada con líquidos orgánicos. No olvidar identificar la muestra adecuadamente y si no puede procesarse antes de 2 horas usar medio de transporte.
Observaciones
Las muestras recibidas en hisopo son de escasa rentabilidad y deben obtenerse sólo en circunstancias muy excepcionales, cuando no se pueda recoger la muestra por otros métodos.
Es importante especificar sitio anatómico de donde se realizó la toma de muestra.
b) ABSCESOS CERRADOS
- Es un procedimiento médico.
- La muestra debe estar en un contenedor estéril. Si se requiere búsqueda de anaerobios introducir en un medio de transporte para anaerobios.
Número de muestras y/o volumen
Deberá enviarse un volumen de muestra entre 1-5 ml.
Transporte y conservación
Las muestras deben enviarse al laboratorio tan pronto como sea posible. Hasta que esto suceda, mantener las muestras y el medio de transporte a temperatura ambiente.
Observaciones
Es muy importante especificar en la solicitud la localización del absceso con vistas a la interpretación de los resultados. Si se carece de recipiente para transporte de muestra para anaerobios consultar al laboratorio.
c) HERIDA QUIRÚRGICA
La toma de muestra se realizará con técnica aséptica luego de limpieza de la zona con suero fisiológico para eliminar la contaminación superficial. Se realizará por punción y se colocará la muestra en recipiente estéril con tapa de rosca, si se sospecha presencia de anaerobios comunicarse con el laboratorio para solicitar medio de transporte. Sí la muestra es obtenida con hisopo realizar primero la limpieza de la zona y luego embeber en el pus el mismo.
d) QUEMADURAS
El tipo de toma de muestra es controvertido, pero los mejores resultados se han logrado con punch de tejido de 3 o 4 mm para realizar cultivos cuantitativos. Se transportan en tubos con tapa rosca estériles.
Pueden hacerse tomas de exudado con hisopo haciendo las siguientes salvedades: solo se cultivaran para búsqueda de aerobios, no se hará cuantificación y además el resultado obtenido puede no ser representativo de la infección.
9.- MUESTRAS DEL TRACTO GASTROINTESTINAL
a) MATERIAS FECALES
Esta muestra se utiliza para el diagnóstico etiológico de gastroenterocolitis aguda.
Excepcionalmente se puede utilizar para la búsqueda de portadores de Salmonella sp. En los laboratorios de Microbiología de índole asistencial de adultos se realiza búsqueda de Escherichia coli enteroinvasiva o enteropatogena Salmonella y Shigella. Si se sospechan otros agentes consultar con el laboratorio de microbiología.
Material necesario
- Recipiente estéril de boca ancha y cierre hermético para enviar la muestra no es necesario que esté estéril, solo es preciso que esté limpio (Ejemplo: frasco de urocultivos). La muestra de heces para colocar en el frasco se recoge con espátula o baja lenguas.
- Medios de transporte para heces. Se emplean sólo si el envío de la muestra se demora y se solicita en laboratorio de Microbiología. Existen sistemas comerciales para bacterias. (Cary-Blair o solución de glicerol tamponado).
Obtención de la muestra
- Si son pastosas se toma una porción del recipiente donde hayan sido emitidas y se transfieren al sistema elegido para el envío al laboratorio. Se seleccionan las partes con mucus, pus o sangre.
- En caso de heces líquidas puede utilizarse jeringa para aspirado del material fecal del recipiente en donde ha sido emitido.
- No es recomendable las muestras contaminadas con orina.
Volumen mínimo
- Heces pastosas: muestras del tamaño de una nuez son muy adecuadas pues permiten realizar la mayoría de los estudios.
- Heces líquidas entre 5 y 10 ml.
Transporte
- En caso necesario de que la muestra no se pudiese enviar en forma inmediata se debe refrigerar, para evitar el sobrecrecimiento de la flora normal que puede enmascarar o destruir a los enteropatógenos. Aunque el frío puede afectar la viabilidad de Shigella spp.
- Si se va a procesar en el plazo de 1 o 2 horas después de su emisión, no necesitan medio de transporte.
- En caso contrario se remiten las muestras en un sistema de transporte para enteropatógenos.
Observaciones
- Las muestras para coprocultivo, deberán tomarse antes de la administración de antimicrobianos y preferiblemente antes de tomar antidiarreicos.
- Si es posible indicar el juicio diagnóstico de presunción y si el paciente es menor de un año.
- En el caso de búsqueda de portadores de Salmonella, se deberá fundamentar adecuadamente el pedido y se necesitan 3 muestras negativas para asegurar que el paciente no es portador.
b) HISOPOS RECTALES
Para conocer la etiología en el caso de una gastroenteritis aguda se debe utilizar una muestra de materia fecal. Los hisopos rectales solo se aceptarán en casos en que no se puedan obtener heces, por ejemplo en neonatos o adultos debilitados, o internados en unidades de cuidados intensivos. Se ha demostrado eficaz en el aislamiento de Neisseria gonorrhoeae, Campilobacter spp, Shigella spp, Clostridium. difficile, virus del Herpes simplex y en portadores anales de Streptococcus pyogenes. No es válido para la búsqueda de antígenos.
Material necesario
- Hisopos con medio de transporte
- Guantes.
Obtención de la muestra
- Para realizar la toma se introduce el hisopo sobrepasando el esfínter anal y se rota para hacer la toma de las criptas anales, mantener allí durante 30 segundos para que se absorban los microorganismos y retirar.
- Una vez realizado se introduce en un medio de transporte.
Transporte
Se envían en medio de transporte adecuado (Stuart, Cary-Blair, para anaerobios en el caso de C. difficile), pues así se protege a las bacterias de la desecación y se envía rápidamente al laboratorio.
Observaciones
Son muestras inadecuadas:
- Hisopos rectales secos.
- Hisopos rectales sin medio de transporte.
- Hisopos con heces cuando se busquen bacterias diferentes de enteropatógenos.
MUESTRAS DIGESTIVAS ALTAS
a) LAVADO GÁSTRICO
Muestra para investigación de BK preferentemente en niños.
Material necesario
- Tubo de lavado gástrico
- Recipientes estériles de boca ancha, tubos con tapón de rosca.
- Suero fisiológico estéril.
Toma de muestra
- Lavado gástrico para estudio de micobacterias.
Volumen mínimo
- Todo lo que se recoge.
Transporte
- Envío rápido al laboratorio, de lo contrario refrigerar a 4ºC hasta 24 horas.
TRACTO GENITAL
a) TRACTO GENITAL FEMENINO: EXUDADO VAGINAL
Esta muestra se utiliza para conocer la etiología en casos de vaginitis y vaginosis. Puede utilizarse para búsqueda de portadoras de Streptococcus del grupo B en embarazadas. Los exudados vaginales se realizan en el laboratorio de microbiología. En el único caso que se aceptarán muestras realizadas fuera del Laboratorio es si la paciente se encuentra internada e imposibilitada de movilizarse.
Material necesario
Condiciones previas:
La paciente no debe tomar antibióticos, ni utilizar soluciones antisépticas vaginales, óvulos ni pomadas en los días previos a la recolección de la muestra. No debe mantener relaciones sexuales 48 horas. antes de la toma de muestra.
- Camilla ginecológica
- Espéculo estéril
- Hisopos de algodón, en medio de transporte.
- Tubo con 1 ml de suero fisiológico y pipeta descartable.
Técnica
- Con la paciente en posición ginecológica se introducirá un espéculo “sin lubricante” (si fuera necesario lubricar, utilizar sólo agua tibia).
- Recoger la muestra, bajo visión directa, con un hisopo del fondo del saco vaginal posterior y colocar en medio de transporte Stuart.
- Repetir la operación con un segundo hisopo.
- Recoger con otro hisopo una muestra de fondo de saco y descargar en el tubo con suero fisiológico.
Número de muestras y/o volumen
- Se obtendrán dos hisopos, uno destinado al estudio microscópico y otro al cultivo.
- La muestra en suero fisiológico se destinará al examen en fresco para investigación de Trichomonas vaginalis.
Transporte y conservación
El envío de la muestra debe ser inmediato siempre que sea posible. Cuando la muestra no pueda procesarse antes de 15 minutos deberán emplearse hisopos con medio de transporte tipo Stuart, que se mantendrán a temperatura ambiente, o preferentemente, en estufa 35-37ºC hasta su procesamiento, que deberá ser antes de 3-6 horas. El examen en fresco deberá observarse inmediatamente o de lo contrario mantener en estufa a 37ºC por no más de 1 hora.
Observaciones
Cuando se sospeche la infección por Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Micoplasma hominis o Ureaplasma urealtycum, deberá enviarse muestra endocervical.
b) EXUDADO ENDOCERVICAL
Esta muestra se utiliza para el diagnóstico etiológico en caso de cervicitis. La toma de muestra se debe realizar en el Laboratorio de Microbiología. En el único caso que se aceptarán muestras realizadas fuera del laboratorio es si la paciente se encuentra internada e imposibilitada de movilizarse.
Material necesario
- Suero fisiológico.
- Jeringa y aguja estériles.
- Recipientes estériles con tapa de rosca.
- Hisopos estériles de algodón
- Medio de transporte Stuart.
Técnica
- Lavar con suero fisiológico estéril cuidadosamente la superficie de la herida para retirar la flora colonizante.
- Recoger el pus mediante jeringa y aguja, aspirando preferentemente de zonas profundas.
- Cuando la muestra sea insuficiente, instilar suero o solución de Ringer lactato y aspirarlo nuevamente en la jeringa.
- Cuando los procedimientos anteriores no sean factibles podrá efectuarse un frotis de los bordes de la herida con un hisopo y con un segundo hisopo se colocara en el medio de transporte.
Número de muestras y/o volumen
Para muestras líquidas se intentará obtener 1-10 ml. En el resto de las ocasiones se enviará la máxima cantidad posible haciendo un extendido en el porta objetos y colocando en medio de transporte.
Transporte y conservación
- El envío al laboratorio debe ser inmediato. Se utilizará para el envío tubos estériles con tapa rosca.
- La jeringa de la extracción será evacuada en el recipiente en que se hará el envío. La práctica de colocar un tapón de goma en la aguja (usando la jeringa como recipiente de transporte) debe desecharse por el riesgo para el personal de sufrir un pinchazo con una aguja contaminada con líquidos orgánicos. No olvidar identificar la muestra adecuadamente y si no puede procesarse antes de 2 horas usar medio de transporte.
Observaciones
Las muestras recibidas en hisopo son de escasa rentabilidad y deben obtenerse sólo en circunstancias muy excepcionales, cuando no se pueda recoger la muestra por otros métodos.
Es importante especificar sitio anatómico de donde se realizó la toma de muestra.
b) ABSCESOS CERRADOS
- Es un procedimiento médico.
- La muestra debe estar en un contenedor estéril. Si se requiere búsqueda de anaerobios introducir en un medio de transporte para anaerobios.
Número de muestras y/o volumen
Deberá enviarse un volumen de muestra entre 1-5 ml.
Transporte y conservación
Las muestras deben enviarse al laboratorio tan pronto como sea posible. Hasta que esto suceda, mantener las muestras y el medio de transporte a temperatura ambiente.
Observaciones
Es muy importante especificar en la solicitud la localización del absceso con vistas a la interpretación de los resultados. Si se carece de recipiente para transporte de muestra para anaerobios consultar al laboratorio.
c) HERIDA QUIRÚRGICA
La toma de muestra se realizará con técnica aséptica luego de limpieza de la zona con suero fisiológico para eliminar la contaminación superficial. Se realizará por punción y se colocará la muestra en recipiente estéril con tapa de rosca, si se sospecha presencia de anaerobios comunicarse con el laboratorio para solicitar medio de transporte. Sí la muestra es obtenida con hisopo realizar primero la limpieza de la zona y luego embeber en el pus el mismo.
d) QUEMADURAS
El tipo de toma de muestra es controvertido, pero los mejores resultados se han logrado con punch de tejido de 3 o 4 mm para realizar cultivos cuantitativos. Se transportan en tubos con tapa rosca estériles.
Pueden hacerse tomas de exudado con hisopo haciendo las siguientes salvedades: solo se cultivaran para búsqueda de aerobios, no se hará cuantificación y además el resultado obtenido puede no ser representativo de la infección.
9.- MUESTRAS DEL TRACTO GASTROINTESTINAL
a) MATERIAS FECALES
Esta muestra se utiliza para el diagnóstico etiológico de gastroenterocolitis aguda.
Excepcionalmente se puede utilizar para la búsqueda de portadores de Salmonella sp. En los laboratorios de Microbiología de índole asistencial de adultos se realiza búsqueda de Escherichia coli enteroinvasiva o enteropatogena Salmonella y Shigella. Si se sospechan otros agentes consultar con el laboratorio de microbiología.
Material necesario
- Recipiente estéril de boca ancha y cierre hermético para enviar la muestra no es necesario que esté estéril, solo es preciso que esté limpio (Ejemplo: frasco de urocultivos). La muestra de heces para colocar en el frasco se recoge con espátula o baja lenguas.
- Medios de transporte para heces. Se emplean sólo si el envío de la muestra se demora y se solicita en laboratorio de Microbiología. Existen sistemas comerciales para bacterias. (Cary-Blair o solución de glicerol tamponado).
Obtención de la muestra
- Si son pastosas se toma una porción del recipiente donde hayan sido emitidas y se transfieren al sistema elegido para el envío al laboratorio. Se seleccionan las partes con mucus, pus o sangre.
- En caso de heces líquidas puede utilizarse jeringa para aspirado del material fecal del recipiente en donde ha sido emitido.
- No es recomendable las muestras contaminadas con orina.
Volumen mínimo
- Heces pastosas: muestras del tamaño de una nuez son muy adecuadas pues permiten realizar la mayoría de los estudios.
- Heces líquidas entre 5 y 10 ml.
Transporte
- En caso necesario de que la muestra no se pudiese enviar en forma inmediata se debe refrigerar, para evitar el sobrecrecimiento de la flora normal que puede enmascarar o destruir a los enteropatógenos. Aunque el frío puede afectar la viabilidad de Shigella spp.
- Si se va a procesar en el plazo de 1 o 2 horas después de su emisión, no necesitan medio de transporte.
- En caso contrario se remiten las muestras en un sistema de transporte para enteropatógenos.
Observaciones
- Las muestras para coprocultivo, deberán tomarse antes de la administración de antimicrobianos y preferiblemente antes de tomar antidiarreicos.
- Si es posible indicar el juicio diagnóstico de presunción y si el paciente es menor de un año.
- En el caso de búsqueda de portadores de Salmonella, se deberá fundamentar adecuadamente el pedido y se necesitan 3 muestras negativas para asegurar que el paciente no es portador.
b) HISOPOS RECTALES
Para conocer la etiología en el caso de una gastroenteritis aguda se debe utilizar una muestra de materia fecal. Los hisopos rectales solo se aceptarán en casos en que no se puedan obtener heces, por ejemplo en neonatos o adultos debilitados, o internados en unidades de cuidados intensivos. Se ha demostrado eficaz en el aislamiento de Neisseria gonorrhoeae, Campilobacter spp, Shigella spp, Clostridium. difficile, virus del Herpes simplex y en portadores anales de Streptococcus pyogenes. No es válido para la búsqueda de antígenos.
Material necesario
- Hisopos con medio de transporte
- Guantes.
Obtención de la muestra
- Para realizar la toma se introduce el hisopo sobrepasando el esfínter anal y se rota para hacer la toma de las criptas anales, mantener allí durante 30 segundos para que se absorban los microorganismos y retirar.
- Una vez realizado se introduce en un medio de transporte.
Transporte
Se envían en medio de transporte adecuado (Stuart, Cary-Blair, para anaerobios en el caso de C. difficile), pues así se protege a las bacterias de la desecación y se envía rápidamente al laboratorio.
Observaciones
Son muestras inadecuadas:
- Hisopos rectales secos.
- Hisopos rectales sin medio de transporte.
- Hisopos con heces cuando se busquen bacterias diferentes de enteropatógenos.
MUESTRAS DIGESTIVAS ALTAS
a) LAVADO GÁSTRICO
Muestra para investigación de BK preferentemente en niños.
Material necesario
- Tubo de lavado gástrico
- Recipientes estériles de boca ancha, tubos con tapón de rosca.
- Suero fisiológico estéril.
Toma de muestra
- Lavado gástrico para estudio de micobacterias.
Volumen mínimo
- Todo lo que se recoge.
Transporte
- Envío rápido al laboratorio, de lo contrario refrigerar a 4ºC hasta 24 horas.
TRACTO GENITAL
a) TRACTO GENITAL FEMENINO: EXUDADO VAGINAL
Esta muestra se utiliza para conocer la etiología en casos de vaginitis y vaginosis. Puede utilizarse para búsqueda de portadoras de Streptococcus del grupo B en embarazadas. Los exudados vaginales se realizan en el laboratorio de microbiología. En el único caso que se aceptarán muestras realizadas fuera del Laboratorio es si la paciente se encuentra internada e imposibilitada de movilizarse.
Material necesario
Condiciones previas:
La paciente no debe tomar antibióticos, ni utilizar soluciones antisépticas vaginales, óvulos ni pomadas en los días previos a la recolección de la muestra. No debe mantener relaciones sexuales 48 horas. antes de la toma de muestra.
- Camilla ginecológica
- Espéculo estéril
- Hisopos de algodón, en medio de transporte.
- Tubo con 1 ml de suero fisiológico y pipeta descartable.
Técnica
- Con la paciente en posición ginecológica se introducirá un espéculo “sin lubricante” (si fuera necesario lubricar, utilizar sólo agua tibia).
- Recoger la muestra, bajo visión directa, con un hisopo del fondo del saco vaginal posterior y colocar en medio de transporte Stuart.
- Repetir la operación con un segundo hisopo.
- Recoger con otro hisopo una muestra de fondo de saco y descargar en el tubo con suero fisiológico.
Número de muestras y/o volumen
- Se obtendrán dos hisopos, uno destinado al estudio microscópico y otro al cultivo.
- La muestra en suero fisiológico se destinará al examen en fresco para investigación de Trichomonas vaginalis.
Transporte y conservación
El envío de la muestra debe ser inmediato siempre que sea posible. Cuando la muestra no pueda procesarse antes de 15 minutos deberán emplearse hisopos con medio de transporte tipo Stuart, que se mantendrán a temperatura ambiente, o preferentemente, en estufa 35-37ºC hasta su procesamiento, que deberá ser antes de 3-6 horas. El examen en fresco deberá observarse inmediatamente o de lo contrario mantener en estufa a 37ºC por no más de 1 hora.
Observaciones
Cuando se sospeche la infección por Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Micoplasma hominis o Ureaplasma urealtycum, deberá enviarse muestra endocervical.
b) EXUDADO ENDOCERVICAL
Esta muestra se utiliza para el diagnóstico etiológico en caso de cervicitis. La toma de muestra se debe realizar en el Laboratorio de Microbiología. En el único caso que se aceptarán muestras realizadas fuera del laboratorio es si la paciente se encuentra internada e imposibilitada de movilizarse.
Material necesario
- Camilla ginecológica.
- Espéculo estéril.
- Torundas para limpieza.
- Hisopos estériles.
- Medio de transporte tipo Stuart.
Técnica
- Con la paciente en posición ginecológica introducir suavemente el espéculo sin lubricar (o lubricado con agua tibia).
- Limpiar el exocérvix de secreciones vaginales, con una torunda seca.
- Bajo visión directa comprimir cuidadosamente el cérvix con palas del espéculo y introducir un hisopo en el canal endocervidal con un suave movimiento de rotación.
- Repetir la operación con el segundo hisopo.
Número de muestras y/o volumen
Deberán recogerse dos hisopos, uno destinado al examen microscópico y otro al cultivo.
Transporte y conservación
Debe ser inmediato. Cuando no puedan procesarse las muestras inmediatamente, se utilizarán hisopos con medio de transporte que se mantendrán a temperatura ambiente o preferentemente a 35-37ºC. Las muestras se procesarán siempre que se pueda antes de las 3 horas, y como máximo en un plazo de 6-12 horas.
c) EXUDADOS URETRALES
Se utiliza para el diagnóstico etiológico en casos de sindrome uretral aguda en la mujer después que se han descartado otras causas. Las etiologías a investigar son N. gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis.
Material necesario
- Hisopos uretrales finos.
- Medio de transporte tipo Stuart.
- Torunda de algodón.
Técnica
- Limpiar cuidadosamente la mucosa circundante con torundas de algodón.
- Introducir el hisopo suavemente con un movimiento de rotación hasta penetrar unos 2 cm dentro de la uretra (3-4 cm para la investigación de Chlamydia trachomatis) repetir la operación con un segundo hisopo.
- Realizar frotis para el examen directo.
- Cuando no haya suficiente exudado, puede estimularse mediante un masaje suave de la uretra contra la sínfisis del pubis, a través de la vagina.
Número de muestras y/o volumen
Deberán enviarse dos hisopos, uno para el examen directo y otro para el cultivo.
Transporte y conservación
Debe ser inmediato. Cuando no puedan procesarse las muestras inmediatamente, se utilizarán hisopos con medio de transporte que se mantendrán a temperatura ambiente o preferentemente a 35-37ºC. Las muestras se procesarán siempre que se pueda antes de las 3 horas, y como máximo en un plazo de 6-12 horas.
Observación
La muestra ha de recogerse preferentemente antes de la primera micción de la mañana, si no es posible, se deberá esperar al menos una hora tras la última micción para recogerla.
d) EXUDADOS RECTALES
- Camilla ginecológica.
- Espéculo estéril.
- Torundas para limpieza.
- Hisopos estériles.
- Medio de transporte tipo Stuart.
Técnica
- Con la paciente en posición ginecológica introducir suavemente el espéculo sin lubricar (o lubricado con agua tibia).
- Limpiar el exocérvix de secreciones vaginales, con una torunda seca.
- Bajo visión directa comprimir cuidadosamente el cérvix con palas del espéculo y introducir un hisopo en el canal endocervidal con un suave movimiento de rotación.
- Repetir la operación con el segundo hisopo.
Número de muestras y/o volumen
Deberán recogerse dos hisopos, uno destinado al examen microscópico y otro al cultivo.
Transporte y conservación
Debe ser inmediato. Cuando no puedan procesarse las muestras inmediatamente, se utilizarán hisopos con medio de transporte que se mantendrán a temperatura ambiente o preferentemente a 35-37ºC. Las muestras se procesarán siempre que se pueda antes de las 3 horas, y como máximo en un plazo de 6-12 horas.
c) EXUDADOS URETRALES
Se utiliza para el diagnóstico etiológico en casos de sindrome uretral aguda en la mujer después que se han descartado otras causas. Las etiologías a investigar son N. gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis.
Material necesario
- Hisopos uretrales finos.
- Medio de transporte tipo Stuart.
- Torunda de algodón.
Técnica
- Limpiar cuidadosamente la mucosa circundante con torundas de algodón.
- Introducir el hisopo suavemente con un movimiento de rotación hasta penetrar unos 2 cm dentro de la uretra (3-4 cm para la investigación de Chlamydia trachomatis) repetir la operación con un segundo hisopo.
- Realizar frotis para el examen directo.
- Cuando no haya suficiente exudado, puede estimularse mediante un masaje suave de la uretra contra la sínfisis del pubis, a través de la vagina.
Número de muestras y/o volumen
Deberán enviarse dos hisopos, uno para el examen directo y otro para el cultivo.
Transporte y conservación
Debe ser inmediato. Cuando no puedan procesarse las muestras inmediatamente, se utilizarán hisopos con medio de transporte que se mantendrán a temperatura ambiente o preferentemente a 35-37ºC. Las muestras se procesarán siempre que se pueda antes de las 3 horas, y como máximo en un plazo de 6-12 horas.
Observación
La muestra ha de recogerse preferentemente antes de la primera micción de la mañana, si no es posible, se deberá esperar al menos una hora tras la última micción para recogerla.
d) EXUDADOS RECTALES
Material necesario
- Guantes
- Hisopos con medio de transporte (Stuart).
Técnica
- Introducir el hisopo suavemente a través del esfinter anal.
- Rotar contra las criptas rectales, dejar 10-30 segundos para que se absorban los microrganismos y extraer.
- Se intentará evitar el contacto con materia fecal.
- Cuando el hisopo salga manchado de heces, deberá tomarse una nueva muestra.
Número de muestras y/o volumen
Basta con un sólo hisopo para cultivo, dado que la visión microscópica no es representativa.
Transporte y conservación
El envío de la muestra debe ser inmediato siempre que sea posible. Cuando la muestra no pueda procesarse antes de 15 minutos, deberán emplearse hisopos con medio de transporte (Stuart), que se mantendrán en estufa a 35-37ºC hasta su procesamiento.
Observación
Cuando se sospeche proctitis por Chlamydia trachomatis, las muestras deberán tomarse mediante visión directa por anoscopía, buscando las lesiones ulcerosas o hipertróficas.
e) VULVA
Material necesario
Hisopos.
- Porta objeto
- Medios de transporte (Stuart).
Técnica
- Realizar antisepsia para las superficies mucosas, limpiar con agua estéril, no usar alcohol ni yodóforo.
- Frotar con el hisopo sobre las lesiones.
- Colocar en medio de transporte y realizar el extendido.
Número de muestras y/o volumen
Deberá obtenerse la mayor cantidad de exudado posible. Cuando se trate de abscesos se intentará obtener al menos 1ml.
Transporte y conservación
Si la muestra no puede enviarse de inmediato se usarán medios de transporte, en el caso de hisopos sirve el medio de Stuart y para punciones de abscesos una parte se introducirá en un medio de transporte para anaerobios.
TRACTO GENITAL MASCULINO
a) EXUDADOS URETRALES
Se utiliza para confirmar el diagnóstico clínico de uretritis y valorar su etiología. No es adecuado si el paciente no tiene corrimiento. La toma de muestra se debe realizar en el laboratorio de microbiología, de preferencia en la mañana y con por lo menos 4 horas de retención urinaria.
Material necesario
- Hisopos finos
- Medio de transporte tipo Stuart.
- Torundas de algodón.
- Asa de siembra de platino
- Potaobjetos.
- Suero fisiológico.
Técnica
- Cuando exista exudado franco puede recogerse con un hisopo o con un asa bacteriológica.
- Se le solicita al paciente que retraiga el prepucio y lo mantenga así durante todo el procedimiento.
- Si no hay corrimiento franco puede estimularse exprimiendo la uretra desde la raíz del pene.
- Cuando no se obtenga exudado se introducirá un hisopo suavemente con un movimiento de rotación hasta penetrar unos 2cm. en la uretra. Repetir la operación con un segundo hisopo.
- Tomar con hisopo secreción y colocar en suero fisiológico para investigación de Trichomonas sp (examen en fresco).
Número de muestras y/o volumen
Deberán obtenerse dos hisopos, uno destinado al examen directo en fresco y otro al cultivo.
Transporte y conservación
Debe ser inmediato. Cuando no puedan procesarse las muestras antes de 15 minutos, se utilizarán hisopos con medio de transporte Stuart que se mantendrán a temperatura ambiente o preferentemente en estufa 35-37ºC. El examen en fresco deberá observarse de inmediato.
Las muestras se procesarán siempre que se pueda antes de 3 horas y como máximo en un plazo de 6-12 horas.
Observación
La muestra ha de recogerse preferentemente antes de la primera micción de la mañana. Si esto es imposible, esperar al menos una hora tras la última micción para recogerla. En algunos casos puede ser rentable realizar la investigación de patógenos de transmisión sexual en la orina del primer chorro.
MUESTRAS PARA DIAGNÓSTICO DE PROSTATITIS
En el caso de prostatitis aguda el diagnóstico se realiza a través del urocultivo y hemocultivos. Las prostatitis crónicas pueden ser de etiología bacteriana o no, por lo cual se valorará mediante las pruebas diagnósticas.
MUESTRAS PARA CHLAMYDIAS UROGENITALES
Para estas muestras deberán seguirse las directrices de cada laboratorio, ya que hisopos, medios de transporte, etc. dependen de la técnica disponible en cada laboratorio.
MUESTRAS PARA INVESTIGACIÓN DE CHLAMYDIAS
Las muestras adecuadas no son las secreciones, ya que Chlamydia trachomatis sólo afecta células escamo-columnares, como las células del epitelio de transición del cérvix. No son adecuadas muestras vaginales para estas determinaciones.
Material necesario
- Espátulas
- Hisopos aportados por el laboratorio de Microbiología.
Técnica
- La muestra se recogerá mediante frotado o raspado enérgico de la zona del cervix, uretra, etc. siguiendo las instrucciones específicas para cada localización.
Número de muestras y/o volumen
Generalmente es suficiente con un hisopo destinado exclusivamente al diagnóstico de Chlamydia.
Transporte y conservación
Las muestras que no puedan ser procesadas de inmediato consultar al laboratorio sobre transporte y conservación más adecuada para la técnica en uso en ese momento.
- Guantes
- Hisopos con medio de transporte (Stuart).
Técnica
- Introducir el hisopo suavemente a través del esfinter anal.
- Rotar contra las criptas rectales, dejar 10-30 segundos para que se absorban los microrganismos y extraer.
- Se intentará evitar el contacto con materia fecal.
- Cuando el hisopo salga manchado de heces, deberá tomarse una nueva muestra.
Número de muestras y/o volumen
Basta con un sólo hisopo para cultivo, dado que la visión microscópica no es representativa.
Transporte y conservación
El envío de la muestra debe ser inmediato siempre que sea posible. Cuando la muestra no pueda procesarse antes de 15 minutos, deberán emplearse hisopos con medio de transporte (Stuart), que se mantendrán en estufa a 35-37ºC hasta su procesamiento.
Observación
Cuando se sospeche proctitis por Chlamydia trachomatis, las muestras deberán tomarse mediante visión directa por anoscopía, buscando las lesiones ulcerosas o hipertróficas.
e) VULVA
Material necesario
Hisopos.
- Porta objeto
- Medios de transporte (Stuart).
Técnica
- Realizar antisepsia para las superficies mucosas, limpiar con agua estéril, no usar alcohol ni yodóforo.
- Frotar con el hisopo sobre las lesiones.
- Colocar en medio de transporte y realizar el extendido.
Número de muestras y/o volumen
Deberá obtenerse la mayor cantidad de exudado posible. Cuando se trate de abscesos se intentará obtener al menos 1ml.
Transporte y conservación
Si la muestra no puede enviarse de inmediato se usarán medios de transporte, en el caso de hisopos sirve el medio de Stuart y para punciones de abscesos una parte se introducirá en un medio de transporte para anaerobios.
TRACTO GENITAL MASCULINO
a) EXUDADOS URETRALES
Se utiliza para confirmar el diagnóstico clínico de uretritis y valorar su etiología. No es adecuado si el paciente no tiene corrimiento. La toma de muestra se debe realizar en el laboratorio de microbiología, de preferencia en la mañana y con por lo menos 4 horas de retención urinaria.
Material necesario
- Hisopos finos
- Medio de transporte tipo Stuart.
- Torundas de algodón.
- Asa de siembra de platino
- Potaobjetos.
- Suero fisiológico.
Técnica
- Cuando exista exudado franco puede recogerse con un hisopo o con un asa bacteriológica.
- Se le solicita al paciente que retraiga el prepucio y lo mantenga así durante todo el procedimiento.
- Si no hay corrimiento franco puede estimularse exprimiendo la uretra desde la raíz del pene.
- Cuando no se obtenga exudado se introducirá un hisopo suavemente con un movimiento de rotación hasta penetrar unos 2cm. en la uretra. Repetir la operación con un segundo hisopo.
- Tomar con hisopo secreción y colocar en suero fisiológico para investigación de Trichomonas sp (examen en fresco).
Número de muestras y/o volumen
Deberán obtenerse dos hisopos, uno destinado al examen directo en fresco y otro al cultivo.
Transporte y conservación
Debe ser inmediato. Cuando no puedan procesarse las muestras antes de 15 minutos, se utilizarán hisopos con medio de transporte Stuart que se mantendrán a temperatura ambiente o preferentemente en estufa 35-37ºC. El examen en fresco deberá observarse de inmediato.
Las muestras se procesarán siempre que se pueda antes de 3 horas y como máximo en un plazo de 6-12 horas.
Observación
La muestra ha de recogerse preferentemente antes de la primera micción de la mañana. Si esto es imposible, esperar al menos una hora tras la última micción para recogerla. En algunos casos puede ser rentable realizar la investigación de patógenos de transmisión sexual en la orina del primer chorro.
MUESTRAS PARA DIAGNÓSTICO DE PROSTATITIS
En el caso de prostatitis aguda el diagnóstico se realiza a través del urocultivo y hemocultivos. Las prostatitis crónicas pueden ser de etiología bacteriana o no, por lo cual se valorará mediante las pruebas diagnósticas.
MUESTRAS PARA CHLAMYDIAS UROGENITALES
Para estas muestras deberán seguirse las directrices de cada laboratorio, ya que hisopos, medios de transporte, etc. dependen de la técnica disponible en cada laboratorio.
MUESTRAS PARA INVESTIGACIÓN DE CHLAMYDIAS
Las muestras adecuadas no son las secreciones, ya que Chlamydia trachomatis sólo afecta células escamo-columnares, como las células del epitelio de transición del cérvix. No son adecuadas muestras vaginales para estas determinaciones.
Material necesario
- Espátulas
- Hisopos aportados por el laboratorio de Microbiología.
Técnica
- La muestra se recogerá mediante frotado o raspado enérgico de la zona del cervix, uretra, etc. siguiendo las instrucciones específicas para cada localización.
Número de muestras y/o volumen
Generalmente es suficiente con un hisopo destinado exclusivamente al diagnóstico de Chlamydia.
Transporte y conservación
Las muestras que no puedan ser procesadas de inmediato consultar al laboratorio sobre transporte y conservación más adecuada para la técnica en uso en ese momento.
CUESTIONARIO
1.- ¿Cuáles son las normas básicas para la toma de muestra en bacteriología?
2.- ¿Cuáles son las medidas de bioseguridad que se debe cumplir para tomar muestras de estudio bacteriológico?
3.- Describa las condiciones y procedimiento para la obtención de una muestra adecuada de esputo.
4.- Indique el procedimiento para tomar una muestra de Hemocultivo.
5.- Fundamente el procedimiento para la obtención de una muestra de exudado faringeo.
6.- ¿En qué condiciones debe estar la paciente para la toma de una muestra vaginal y vulvar?
7.- ¿Cómo se debe tomar una muestra de secreción conjuntival?
8.- ¿Por qué debe llegar la muestra de orina para urocultivo lo antes posible al Area de bacteriología? Explique.
9.- Describa cómo realizar la toma de muestra de cualquier secreción desde que ingresa el paciente hasta que lo despide.
10.- Mencione alguna sugerencia que pueda ayudar a mejorar el área de bacteriología.
1.- ¿Cuáles son las normas básicas para la toma de muestra en bacteriología?
2.- ¿Cuáles son las medidas de bioseguridad que se debe cumplir para tomar muestras de estudio bacteriológico?
3.- Describa las condiciones y procedimiento para la obtención de una muestra adecuada de esputo.
4.- Indique el procedimiento para tomar una muestra de Hemocultivo.
5.- Fundamente el procedimiento para la obtención de una muestra de exudado faringeo.
6.- ¿En qué condiciones debe estar la paciente para la toma de una muestra vaginal y vulvar?
7.- ¿Cómo se debe tomar una muestra de secreción conjuntival?
8.- ¿Por qué debe llegar la muestra de orina para urocultivo lo antes posible al Area de bacteriología? Explique.
9.- Describa cómo realizar la toma de muestra de cualquier secreción desde que ingresa el paciente hasta que lo despide.
10.- Mencione alguna sugerencia que pueda ayudar a mejorar el área de bacteriología.
11. ¿Que conoce sobre las bacterias, virus y hongos?
12. Cite la diferencia que hay entre estas
13. ¿Conoce como se encuentran en la naturaleza?
14. Describa cada una de ellas
